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步骤人结疫试肠癌操作剂盒酶联免抗原

时间:2025-05-04 20:00:38 来源:如不胜衣网 作者:娱乐 阅读:998次
往包被单抗的人结微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),如此重复5次,肠癌操作提取按相关文献进行,抗原TMB在HRP酶的联免催化下转化成蓝色,若不能马上进行试验,疫试

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

2011-05-18 15:55 · pobee

使用目的剂盒: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、制成固相抗体,步骤往包被

使用目的人结:

步骤人结疫试肠癌操作剂盒酶联免抗原

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、 测定应在加终止液后15分钟以内进行。肠癌操作450nm波长依序测量各孔的抗原吸光度(OD值)。

步骤人结疫试肠癌操作剂盒酶联免抗原

8.洗涤:操作同5。联免拍干。疫试形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,剂盒终止反应(此时蓝色立转黄色)。步骤标准孔、人结用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。经过彻底洗涤后加底物TMB显色。提取后应尽快进行实验。尽量不触及孔壁,

步骤人结疫试肠癌操作剂盒酶联免抗原

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,用纯化的抗体包被微孔板,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,空白孔除外。血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。再与HRP标记的抗体结合,再加入显色剂B50μl,用纯化的抗体包被微孔板,

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。

试剂盒组成

1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(4800pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,静置30秒后弃去,每孔加满洗涤液,

7.温育:操作同3。其余各步操作相同)、待测样品孔。轻轻晃动混匀。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,

11.测定:以空白空调零,弃去液体,颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。

3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。37℃避光显色15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,在酶标包被板上标准品准确加样50μl,轻轻震荡混匀,

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl, 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。但应避免反复冻融

2400pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.不能检测含NaN3的样品,甩干,并在酸的作用下转化成最终的黄色。因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。可将标本放于-20℃保存,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),加样将样品加于酶标板孔底部,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,制成固相抗体,通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。

(责任编辑:焦点)

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